Mouse GPX4 ELISA Kit（小鼠谷胱甘肽过氧化酶4 ELISA试剂盒）

▎  GPX4 概述

谷胱甘肽过氧化酶4（GPX4），该基因编码的蛋白质属于谷胱甘肽过氧化物酶家族，该家族成员能催化过氧化氢、有机过氧化物和脂质过氧化物的还原，从而保护细胞免受氧化损伤。在脊椎动物中，该基因家族存在多种同工酶，其细胞定位和底物特异性各不相同。该同工酶对脂质过氧化物具有高度偏好性，能保护细胞免受膜脂质过氧化和细胞死亡的侵害。它对精子的正常发育也是必需的；因此，由于其具有作为过氧化物酶和成熟精子中结构蛋白的双重功能，它已被确定为一种“兼职”蛋白质。该基因的突变与塞达加蒂安型脊柱骨骺发育不良（SMDS）相关。该同工酶也是一种硒蛋白，其活性部位含有稀有氨基酸硒代半胱氨酸（Sec）。Sec由UGA密码子编码，而UGA通常表示翻译终止。硒蛋白mRNA的3'非翻译区（UTR）包含一个保守的茎环结构，称为硒代半胱氨酸插入序列（SECIS）元件，该元件对于将UGA识别为Sec密码子而非终止信号是必需的。据描述，由可变剪接或使用替代启动子产生的转录变体可编码具有不同亚细胞定位的异构体。

▎  别名

MCSP; SMDS; GPx-4; PHGPx; snGPx; GSHPx-4; snPHGPx

▎  用途

该试剂盒采用“一步”夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）体外定量检测血清、血浆、组织、细胞或其他相关生物液体中 GPX4 浓度。

▎  检测原理

将目标抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的目标连接于固相载体上的抗体结合，然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体，将未结合的抗体洗净后再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。

▎  特异性

可检测样本中的GPX4 , 且与其它类似物无明显交叉反应。

▎  重复性

板内，板间变异系数均<10%。

▎  标曲图

▎  批内差

取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测，每份样本连续测定20次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。

▎  批间差

选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值

▎  精密度

精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV（%）=SD/mean×100  CV<10% Inter-批间差: CV<13%

▎  稳定性

经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

▎  试剂盒的组成

▲未开封试剂盒，4℃保存；已开封，标准品-20℃保存，酶标板加干燥剂后密封-20℃保存，其他4℃保存。

▎  实验所需自备物品

1、450±10nm滤光片酶标仪（建议仪器使用前预热）  

2、高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.   

3、Eppendorf 移液器.   

4、蒸馏水或去离子水.   

5、脱脂棉吸水纸.   

6、37℃恒温箱.  

7、100ml和1000ml量筒.

▎  ELISA操作视频