▶试剂盒要使用多次，但样本较多，是否可以只做一次标曲？
2022-02-24
⚠️ 不可仅做一次标曲！
即使使用同一试剂盒，每次实验必须重新制作标准曲线，原因如下：
实验变量不可控：温湿度波动、酶标板包被均一性、洗板效果、仪器校准差异等均会导致OD值偏移。
试剂稳定性限制：稀释后的标准品易降解（即使分装冻存），且显色底物活性随时间下降。
数据可靠性保障：标曲需与样本同批次处理，避免跨次实验的系统误差。
⚠️ 标曲重复制作必要性
影响因素 | 标曲失效风险 |
温度波动 | 孵育温度偏差2℃可导致OD值变化＞10%（尤其对温度敏感的抗体）。 |
酶标板差异 | 不同板孔包被均一性差异（边缘效应常见），需同板包含标曲和样本。 |
洗板残留 | 洗液残留量变化可能干扰抗原-抗体结合，需同一批次洗板操作标准化。 |